安捷倫色譜柱在色譜分析系統(tǒng)中起著重要作用,是色譜分析的核心組成部分。正確使用和維護(hù)色譜柱非常重要。使用不當(dāng)會(huì)降低色譜柱效率,縮短使用壽命甚至損壞色譜柱。您是否遇到過這些錯(cuò)誤?
溫度的突然變化或色譜柱的下降會(huì)影響色譜柱的填充條件。色譜柱壓力的突然升高或降低也會(huì)沖擊色譜柱中的填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱中填料的穩(wěn)定性。
2,避免直接改變?nèi)軇┑某煞?/div>
為了改變測(cè)試樣品溶液的組成,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,尤其是在反相色譜法中,而不是直接從有機(jī)溶劑到所有水,反之亦然。當(dāng)使用具有較強(qiáng)二次洗脫能力的洗脫液洗滌色譜柱時(shí),對(duì)流系統(tǒng)中的流動(dòng)相應(yīng)由可混溶的溶劑逐漸轉(zhuǎn)移,每個(gè)流動(dòng)相的體積應(yīng)約為柱體積的20倍。也就是說,常規(guī)分析需要50-75ml。
3,避免柱后坐
一般來說,該柱不能反沖。只有在色譜柱說明手冊(cè)中指出色譜柱可以回卷時(shí),才能清除殘留在色譜柱頭上的雜質(zhì)。否則,反洗安捷倫色譜柱的效果是迅速降低色譜柱效率。
4,避免因流動(dòng)相使用不當(dāng)而損壞固定相
選擇合適的流動(dòng)相以避免破壞固定相。有時(shí)可以在進(jìn)樣器的前面連接一個(gè)預(yù)柱。當(dāng)分析柱為鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可以使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前被硅膠“飽和”,以避免硅膠基質(zhì)溶解在分析柱中。
5,未經(jīng)處理請(qǐng)勿使樣品進(jìn)入色譜柱
為了避免將復(fù)雜的基質(zhì)樣品(特別是生物樣品)直接注入色譜柱,必須對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接保護(hù)柱。保護(hù)柱通常是填充有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以并且應(yīng)該經(jīng)常更換。
6,緩沖液不要長(zhǎng)時(shí)間保存在色譜柱中
儲(chǔ)存色譜柱時(shí),應(yīng)在其中填充乙腈或甲醇,并擰緊色譜柱接頭以防止溶劑揮發(fā)和干燥。請(qǐng)勿將緩沖溶液在色譜柱中放置過夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
7,禁止未經(jīng)處理直接密封色譜柱
使用安捷倫色譜柱后,必須用適當(dāng)?shù)娜軇┣逑础H绻唤?jīng)常使用安裝在液相色譜儀上的色譜柱,則應(yīng)每4-5天將其啟動(dòng)并沖洗15分鐘。