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HILIC 色譜柱
資生堂液相色譜柱|資生堂公司色譜柱代理
HILIC是Hydrophilic Interaction Chromatography的簡(jiǎn)稱,即“親水性相互作用色譜”。在HILIC模式下,通過鍵合極性官能團(tuán)的固定相與反相模式常用的CH3CN / H2O系流動(dòng)相的組合,來對(duì)親水性化合物進(jìn)行保留與分離,因此,HILIC是在HPLC的分離模式中zui常使用的反相模式的反相,故也被稱為“反反相模式”。PC HILIC色譜柱將構(gòu)成細(xì)胞膜的成分作為官能團(tuán),對(duì)親水性化合物的保留具有優(yōu)勢(shì)。
物性值
官能團(tuán) | 細(xì)孔徑 (nm) | 粒徑 (μm) | 比表面積 (m2/g) | pH范圍 |
---|---|---|---|---|
PC(磷酸膽堿基) | 10 | 5 | 450 | 3~7.5 |
PC(磷酸膽堿基) | 10 | 3 | 450 | 3~7.5 |
HILIC模式是指
在HILIC模式下,親水性的固定相表面形成了水和相,樣品的分配在流動(dòng)相與水和相之間進(jìn)行。因此,與水和相親和力較強(qiáng)的極性化合物會(huì)被保留,而弱極性化合物基本不被保留,很快被溶出。因?yàn)轱@示出與反相模式相反的分離模式,對(duì)在反相模式下難以取得保留的極性化合物能夠發(fā)揮優(yōu)勢(shì)。如下圖所示,通過提高流動(dòng)相中有機(jī)相的比例,在HILIC模式下極性化合物的保留得到了增強(qiáng)。
保留行為隨乙腈比例的變化
色譜柱:PC HILIC S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流動(dòng)相:10 mmol/L HCOONH4, x% CH3CN
流 速:1.0 mL/min
溫 度:40℃
檢 測(cè):UV 254 nm
樣 品:①萘 ②胸腺嘧啶 ③腺嘌呤 ④胞核嘧啶
PC是指
磷酸膽堿(PC)是構(gòu)成細(xì)胞膜的成分,具有甜菜堿結(jié)構(gòu),擁有高親水性和生體適應(yīng)性,能抑制蛋白質(zhì)的吸附。
PC HILIC是將資生堂的填料合成技術(shù)應(yīng)用于資生堂*的PC填料素材而誕生的HILIC模式用色譜柱。在硅膠基材表面以PC基團(tuán)進(jìn)行修飾,實(shí)現(xiàn)了適用于HILIC色譜柱的超親水性填料的制造。與以未修飾硅膠作為填料的硅膠色譜柱相比,PC HILIC的親水性更強(qiáng),對(duì)極性化合物核酸堿基的保留更強(qiáng)。
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PC的超親水性
色譜柱:PC HILIC S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流動(dòng)相:10 mmol/L CH3COONH4, CH3CN / H2O = 90 / 10
流 速:1.0 mL/min
溫 度:40℃
檢 測(cè):UV 254 nm
樣 品:①萘 ②胸腺嘧啶 ③胞核嘧啶
對(duì)極性化合物的保留強(qiáng)
高理論塔板數(shù)
堿性化合物以對(duì)稱、尖銳的峰形出峰
尿囊素
下圖為對(duì)中性化合物尿囊素的分析結(jié)果。
尿囊素雖為中性化合物,但極性很強(qiáng),在反相色譜柱上很難得到保留,而適用于分析極性化合物的PC HILIC能對(duì)尿囊素得到充分的保留與分離。
阿米替林
對(duì)于在反相模式下經(jīng)常引起拖尾的堿性化合物代表——阿米替林進(jìn)行分析。由于PC HILIC色譜柱中,以PC對(duì)硅膠表面進(jìn)行了均勻的修飾,因此水和相與流動(dòng)相之間的分配能平滑順利地進(jìn)行,不會(huì)出現(xiàn)峰形拖尾的現(xiàn)象,理論塔板數(shù)也非常高。
色譜柱:PC HILIC S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流動(dòng)相:10 mmol/L CH3COONH4, CH3CN / H2O = 90 / 10
流 速:1.0 mL/min
溫 度:30℃
檢 測(cè):UV 254 nm
樣 品:阿米替林
核酸堿基
在酸性條件下對(duì)極性化合物核酸堿基進(jìn)行分析。PC HILIC色譜柱與其他公司的HILIC色譜柱相比,因其具有*親水性,對(duì)核酸堿基得到了良好保留,有利于分離。另外,理論塔板數(shù)也很高,峰形也很尖銳。
色譜柱:S5; 4.6 mm i.d. × 250 mm
流動(dòng)相:10 mmol/L HCOONH4 (pH 3.5) / CH3CN = 10 / 90
流 速:1.0 mL/min
溫 度:40℃
檢 測(cè):UV 254 nm
樣 品:①萘 ②胸腺嘧啶 ③腺嘌呤 ④胞核嘧啶
產(chǎn)品一覽表
■PC HILIC
產(chǎn)品編號(hào) | 類型 | 粒徑 (μm) | 內(nèi)徑 (mm) | 長(zhǎng)度 (mm) |
---|---|---|---|---|
F93152 | PC HILIC | 3 | 2.0 | 50 |
F93154 | PC HILIC | 3 | 2.0 | 100 |
F93155 | PC HILIC | 3 | 2.0 | 150 |
F93162 | PC HILIC | 3 | 4.6 | 50 |
F93165 | PC HILIC | 3 | 4.6 | 100 |
F93102 | PC HILIC | 5 | 2.0 | 50 |
F93104 | PC HILIC | 5 | 2.0 | 100 |
F93105 | PC HILIC | 5 | 2.0 | 150 |
F93106 | PC HILIC | 5 | 2.0 | 250 |
F93112 | PC HILIC | 5 | 4.6 | 50 |
F93114 | PC HILIC | 5 | 4.6 | 100 |
F93115 | PC HILIC | 5 | 4.6 | 150 |
F93116 | PC HILIC | 5 | 4.6 | 250 |
F93120 | PC HILIC | 5 | 10 | 20G* |
F93125 | PC HILIC | 5 | 10 | 150 |
F93126 | PC HILIC | 5 | 10 | 250 |
F93140 | PC HILIC柱芯(2PCS) | 5 | 2.0 | 10 |
F93141 | PC HILIC柱芯(2PCS) | 5 | 4.0 | 10 |
F93145 | PC HILIC柱芯(2PCS) | 3 | 2.0 | 10 |
F93146 | PC HILIC柱芯(2PCS) | 3 | 4.0 | 10 |
*G : 保護(hù)柱
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