液相色譜分析有氣泡？這樣來(lái)解決!

      液相色譜分析有氣泡？這樣來(lái)解決!

在操作液相色譜時(shí)，有沒(méi)有為老是出現(xiàn)氣泡而崩潰？有沒(méi)有為超聲波震蕩了一個(gè)小時(shí)，流動(dòng)相還出現(xiàn)氣泡，而暈倒？有沒(méi)有為天氣晴好的時(shí)候沒(méi)出現(xiàn)氣泡，陰天、下雨天，同一瓶，出現(xiàn)了氣泡，而對(duì)自己的工作失去信心？

在操作液相色譜時(shí)，流動(dòng)相出現(xiàn)氣泡，那整個(gè)工作就沒(méi)法進(jìn)行了。

超聲波震蕩了一個(gè)小時(shí)的流動(dòng)相，為什么天氣晴好的時(shí)候沒(méi)出現(xiàn)氣泡，陰天、下雨天就會(huì)出現(xiàn)；是因?yàn)殛幪臁⑾掠晏炜諝鈿鈮合陆?，引起溶在流?dòng)相中的空氣過(guò)飽和（晴天時(shí)氣壓高還沒(méi)飽和），當(dāng)高壓泵抽取流動(dòng)相時(shí)，空氣析出，產(chǎn)生了氣泡。

超聲波震蕩了一個(gè)小時(shí)的流動(dòng)相，為什么里面還有空氣呢？這是由于在常壓下震蕩，驅(qū)趕空氣效果不行。

如果把裝流動(dòng)相的瓶子進(jìn)行抽真空，同時(shí)進(jìn)行超聲波震蕩，效果會(huì)怎么樣呢？效果非常好，只要1min，流動(dòng)相中的空氣差不多沒(méi)了；經(jīng)過(guò)這樣驅(qū)逐空氣的流動(dòng)相，陰天、下雨天使用也不會(huì)出現(xiàn)氣泡了；而且省時(shí)，不用動(dòng)不動(dòng)半小時(shí)、一小時(shí)超聲波震蕩；并且效果非常好。

由于氣泡的存在，會(huì)造成色譜圖上出現(xiàn)尖銳的噪聲峰，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成分析靈敏度下降；氣泡變大進(jìn)入流路或色譜柱時(shí)會(huì)使流動(dòng)相的流速變慢或不穩(wěn)定，使基線起伏。

造成上述現(xiàn)象的主要原因有三條：

一是流動(dòng)相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡；

二是系統(tǒng)開(kāi)始工作時(shí)未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈；

三是在注入樣品時(shí)不注意混入了空氣。

而液相色譜儀在使用中，整個(gè)液路系統(tǒng)有兩個(gè)地方易產(chǎn)生氣泡！

1、泵頭吸液白管;2、檢測(cè)口流通池。 

氣泡產(chǎn)生的原因大多數(shù)是因?yàn)椋?/span>

溫度上升，壓力下降！溫度上升或柱溫上升，當(dāng)接近試劑沸點(diǎn)時(shí)，試劑汽化產(chǎn)生氣泡，試劑中已含微小氣泡，因加熱變大而產(chǎn)生氣泡。

壓力下降產(chǎn)生氣泡，流動(dòng)相中一直包含微小氣泡，無(wú)論超聲過(guò)濾，均不能池底去掉它，那么當(dāng)壓力下降時(shí)，微小氣泡將長(zhǎng)大，且多個(gè)小氣泡易聚集成大氣泡，而影響正常實(shí)驗(yàn)。

氣泡產(chǎn)生原因及解決辦法:

一、泵頭及吸液白管。

1、泵頭：泵頭是壓力變化zui劇烈的地方，也是zui易產(chǎn)生氣泡的地方，泵頭靠負(fù)壓而吸液，而負(fù)壓必然使流動(dòng)相中的小氣泡長(zhǎng)大，當(dāng)泵腔變正壓時(shí)，已長(zhǎng)大的氣泡未必能全部變小流入后續(xù)液路，則泵腔內(nèi)將積存氣泡，從而影響吸液精度，鑒于此，泵頭上專門(mén)設(shè)計(jì)了排氣閥，便于泵頭排氣，觀察柱壓穩(wěn)定了說(shuō)明泵頭排氣成功。

2、吸液白管長(zhǎng)氣泡。

a、吸液白管接觸空氣部位漏氣，產(chǎn)生可見(jiàn)氣泡，吸液白管是常壓和負(fù)壓交臂變化部位，其漏表現(xiàn)為大氣進(jìn)入白管內(nèi)，而不易見(jiàn)到管內(nèi)液體漏出。

處理方法：更換白管。

b、濾頭堵：濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降，泵強(qiáng)制吸液而產(chǎn)生真空氣泡。

判斷：拔掉濾頭不再長(zhǎng)氣泡則是濾頭堵。

處理：A、30%硝酸水液超洗濾頭，20分鐘左右。 B、水超洗濾頭，注意換水多超幾次。

 

處理：超聲，降室溫。

 

二、檢測(cè)流通池長(zhǎng)氣泡

流通池是易積存氣泡的地方，其對(duì)基線影響巨大，流動(dòng)相流入色譜柱后，壓力越來(lái)越小，微小氣泡將逐漸長(zhǎng)大，而流通池截面積遠(yuǎn)大于鋼管面積，則氣泡在池內(nèi)易長(zhǎng)大，氣泡的特點(diǎn)是長(zhǎng)大在無(wú)外壓的情況下，很難縮小到鋼管內(nèi)經(jīng)以下流出流通池，所以它就存在了池內(nèi)。 處理方法：1、對(duì)于示差檢測(cè)器（示差檢測(cè)器池只能耐幾個(gè)公斤壓力），只能是反復(fù)沖洗斥資，舉高廢液瓶靠廢液管內(nèi)液柱給池加一個(gè)微小反壓，所以這就靠成了示差池子排氣困難些，但無(wú)它法。 

為了避免這類問(wèn)題的出現(xiàn)，液相色譜實(shí)際分析過(guò)程中必須重視對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理。

常用的脫氣方法有以下幾種：

1. 吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動(dòng)相10-15min以驅(qū)除溶解的氣體。此法使用于所有的溶劑，脫氣效果較好，但在國(guó)內(nèi)因氦氣價(jià)格較貴，本法使用較少；

2. 加熱回流法 此法的脫氣效果較好；

3. 抽真空脫氣法 此時(shí)可使用微型真空泵，降壓至0.05-0.07MPa即可除區(qū)溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過(guò)濾機(jī)械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會(huì)引起混合溶劑組成的變化，故此法適用于單一溶劑體系脫氣。對(duì)多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合，以保證混合后的比例不變。

4. 超聲波脫氣法 它是目前實(shí)驗(yàn)室使用zui廣泛的脫氣方法，將配制好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡(jiǎn)便，基本能滿足日常分析的要求。

5. 在線真空脫氣法 把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲(chǔ)液系統(tǒng)中，并結(jié)合膜過(guò)濾器，實(shí)現(xiàn)了流動(dòng)相在進(jìn)入輸液泵前的連續(xù)真空脫氣。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法，并適用于多元溶劑體系。

其二，在液相色譜系統(tǒng)開(kāi)始工作前，可以用注射器連接恒流泵的排空閥，抽入流動(dòng)相，將流路中的空氣驅(qū)趕干凈。

其三，在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。